尿激酶原基因疗法防治血管吻合口内膜增生的实验研究

摘要

为了探讨防止血管吻合口内膜增生的新方法，了解尿激酶原（ｐｒｏ－ｕｋ）基因疗法对吻合口内膜增生的影响。方法用浸泡过ｐＮ２－ｐｒｏ－ｕｋ质粒溶液的１１／０医用尼龙缝线进行大鼠颈总动脉原位端端吻合。实验动物随机分为对照组和治疗组。对照组应用的缝线浸泡过ｐＮ２质粒溶液，治疗组应用的缝线浸泡过ｐＮ２－ｐｒｏ－ｕｋ质粒溶液。提取吻合口组织的ＲＮＡ与ｐｒｏ－ｕｋ探针，进行Ｎｏｒｔｈｅｒｎ印迹杂交，应用纤维蛋白平板溶圈法检测吻合口组织的纤溶酶活力，并进行粘附于吻合口同位素标记的血小板计数，吻合口同位素掺入量和病理形态学检测等观察。结果治疗组Ｎｏｒｔｈｅｒｎ印迹杂交在１８Ｓ稍下方有一杂交带，对照组则无这杂交带。治疗组术后２、７、１４天和９０天均检测到纤溶酶活力，术后第７天活力最高，对照组则未检测到纤溶酶活力，治疗组粘附于吻合口同位素标记的血小板数目、３Ｈ－ＴｄＲ掺入量、吻合口内膜面积均明显少于对照组（Ｐ＜０．０１）。结论用浸泡过ｐＮ２－ｐｒｏ－ｕｋ质粒溶液的医用缝线进行血管吻合，ｐｒｏ－ｕｋ基因可在吻合口组织中表达出有生物活性的ｐｒｏ－ｕｋ，并能有效地抑制吻合口内膜增生。其机制与减轻吻合口血小板沉积和粘附有关。