特异性体外扩增人γδT淋巴细胞及其生物学特性的研究

摘要

探讨人γδＴ淋巴细胞体外特异性激发的方法，及其杀伤肿瘤细胞的分子机理。方法采用人多发性骨髓瘤细胞株ＸＧ－７细胞作为刺激细胞，与人外周血单个核细胞体外共同培养，激发和扩增人γδＴ淋巴细胞。以流式细胞仪或间接免疫荧光技术分析细胞表型；再以５１Ｃｒ４小时释放试验检测γδＴ淋巴细胞对肿瘤细胞的杀伤效应。结果（１）采用本培养系统，可以使来自健康人或肿瘤患者的外周血γδＴ淋巴细胞得以选择性激发和扩增，由４．８％±３．４％增加至４６．０％±８．３％，在白细胞介素２（ＩＬ－２）的作用下，能迅速、大量地增殖，３周内可达１０１０以上数量级。（２）所扩增的γδＴ淋巴细胞，对肿瘤细胞株（天然杀伤细胞敏感株Ｋ５６２和淋巴因子激活的杀伤细胞敏感株Ｄａｕｄｉ）皆可介导高效杀伤活性，而对正常淋巴母细胞则无明显细胞毒作用。（３）抗热休克蛋白（ＨＳＰ）－７０单克隆抗体可阻断γδＴ淋巴细胞对ＸＧ－７细胞的反应。结论本室建立的人γδＴ淋巴细胞体外激发、扩增的方法，具有简便、迅速、重复性好的特点，对肿瘤细胞具有广谱的细胞毒活性，在肿瘤的过继免疫治疗中具有潜在的临床应用价值。