大剂量Bcl-2反义硫代磷酸寡核苷酸对细胞系的毒性作用

摘要

目的 探讨大剂量Bcl 2反义硫代磷酸寡脱氧核苷酸 （AS PS ODN ,ASPO）对HL6 0细胞系的毒性作用 ,同时了解毒性与剂量的关系。方法 应用四氮唑蓝比色法、台盼蓝拒染试验 ,CFU HL6 0克隆培养法观察大剂量Bcl 2ASPO对HL6 0细胞的毒性作用 ,同时应用免疫细胞化学染色及流式细胞仪检测P2 6Bcl 2蛋白表达 ,吖啶橙染色及DNA片段电泳对细胞凋亡的观察。并以其正义PS ODN（SPO）为反义序列非特异性毒性对照。用SPSS软件包进行剂量 效应曲线直线化回归分析。结果 （1）当ASPO、SPO剂量为 2 0 μmol/L时 ,即出现对HL6 0细胞生长的非特异性毒性作用 ;在 16 0μmol/L时 ,其非特异性毒性出现明显增加。对HL6 0细胞生长的抑制率分别为 40 %、18%。 （2 ）量效曲线回归分析表明当剂量为 2 6 2 μmol/L时 ,ASPO与SPO的毒性作用无差别。 （3） 16 0 μmol/LASPO、SPO对Bcl 2蛋白表达率分别为 2 8%、78% ,将ASPO、SPO作用后的HL6 0细胞进行克隆传代发现Bcl 2表达阳性率反跳分别达 99.6 %、97.8%。结论 Bcl 2ASPO虽为低毒药物 ,但仍存在剂量依赖性毒性作用。其对HL6 0细胞作用的适合剂量以不超过 134μmol/L为宜