人类白细胞抗原-Ⅰ类抗原的DNA分型与临床应用

摘要

目的采用顺序特异引物聚合酶链反应技术（ＰＣＲＳＳＰ）建立汉族人群白细胞抗原Ⅰ（ＨＬＡⅠ）类抗原Ａ、Ｂ位点ＤＮＡ分型方法。方法设计合成８１个特异性引物和１对阳性对照引物，组成２０个ＰＣＲ反应用于Ａ位点分型、４１个ＰＣＲ反应用于Ｂ位点分型，建立一步法ＰＣＲＳＳＰ方法，应用于６２份标准ＤＮＡ和３４５例肾移植供受者的ＨＬＡⅠ类ＤＮＡ分型。结果所有样本ＰＣＲＳＳＰ基因分型均获得成功，无假阳性和假阴性出现，４０份样本的重复率１００％，总耗时５小时。分型结果经双盲验证完全符合。可准确分辨出Ａ位点等位基因１９个、Ｂ位点等位基因４１个；实际检出汉族人群Ａ抗原特异性１３个、Ｂ抗原特异性３２个。结论ＰＣＲＳＳＰ技术行ＨＬＡⅠ类Ａ、Ｂ位点ＤＮＡ分型，分辨率高、特异性强、重复性好、相对简捷快速，分型结果较血清学方法更加精确可靠，适合于临床应用