血管生长素基因转染5-氮胞苷诱导后的骨髓基质细胞移植于缺血心肌的实验研究

摘要

目的 利用编码血管生长素基因的腺病毒 （Ad .ANG）转染 5 氮胞苷 （5 aza）诱导骨髓基质细胞 （BMSC） ,移植于大鼠缺血心肌后对心功能的保护和促血管新生作用。方法 体外培养Lewis大鼠的骨髓基质细胞 ,使用 3μmol/L的 5 aza体外强化诱导 2 4h ;然后在 5 0倍的转染倍数 （病毒数 /靶细胞 ）下 ,用Ad .ANG转染诱导BMSC。通过ELISA方法检测其对ANG的表达和分泌。然后将其移植于结扎了冠状动脉前降支的Lewis大鼠缺血心肌内 （组Ⅰ ）。同时设置单纯细胞移植组 （组Ⅱ ）和基因治疗组 （组Ⅲ ） ,以注射无血清培养基的实验动物为对照组 （组Ⅳ ）。通过心脏射血分数 （EF）、左室舒张末期容积等超声指标研究其对心功能的保护作用 ;另外通过免疫组化、电镜研究细胞存活、分化和血管新生情况。结果 Ad ANG转染BMSC后 ,在培养上清中ANG大量出现 ,4～ 7d时达到表达高峰 ,15d后仍可检测到蛋白质表达。移植于缺血心肌 4周后 ,组Ⅰ和组Ⅱ缺血区的移植细胞大部分分化为心肌样细胞 ,组ⅠEF改善程度明显好于组Ⅱ （P ＜0 0 5 ）、组Ⅲ （P ＜0 0 1）和组Ⅳ （P ＜0 0 1） ,在促血管新生方面 ,组Ⅰ也明显优于以上 3组 （组Ⅰ 36 3个 /HPF ;组Ⅱ 10 5个 /HPF ;组Ⅲ 2 3 1个 /HPF ;组Ⅳ 0 9个 /HPF）。结论 转染Ad ANG后的BMSC移植于缺?