环氧合酶2反义寡核苷酸对胰腺癌新生血管生成的抑制作用

摘要

目的 研究环氧合酶 2反义寡核苷酸 （COX 2AS ODN）对胰腺癌新生血管生成的抑制作用 ,探讨前列腺素E2 （PGE2 ）在胰腺癌新生血管生成中的调节作用。方法 设计、合成特异性靶向COX 2AS ODN。人胰腺癌PC 3细胞进行体外培养 ,转染COX 2AS ODN后 0、12、2 4、4 0、和 72h以荧光显微镜观察细胞情况。第二批PC 3细胞用于研究量 效关系 ,分为 5组 :对照组、Lipo组 （接种Lopofectin脂质体 ）、C1组 （ 1μgCOX 2AS ODN +Lipo/孔 ）、C2组 （ 2 μgCOX 2AS ODN +Lipo/孔 ）、和C3组 （ 3μgCOX 2AS ODN +Lipo/孔 ）。第三批PC 3细胞用于研究时 效关系 ,接种 3μgCOX 2AS ODN +Lipo/孔后观察 0、12、2 4、4 8、和 72h。用RT PCR观察COX 2mRNA的表达。以Western印迹观察分别加入 3μg和 9μgCOX 2AS ODN/瓶后PC 3细胞COX 2蛋白质的表达。 18只鸡胚分 3组 ,其绒毛尿囊 （CAM ）分别接种PC 3细胞以及Lipo、Lipo +COX 2AS ODN、Lipo +COX 2AS ODN +前列腺素E2 （PGE2 ） ,另 6只鸡胚仅接种PC3细胞用作对照。用Leica体视显微镜观察新生血管生成情况。结果 RT PCR示随转染COX 2AS ODN浓度的增加 ,PC3细胞的COX 2mRNA表达逐渐下调 （直到COX 2AS ODN浓度为 0 .2 μmol/L时 ）。COX 2AS ODN的作用于 12h后最强 ,以后渐弱 ,4 8h后基本?