莱菔子素诱导结肠癌Caco-2细胞株葡萄糖醛酸转移酶1A的表达及其机制

摘要

目的探讨莱菔子素（SFN）对结肠癌Caco-2细胞株葡萄糖醛酸转移酶1A（UGT1A）表达的诱导作用及其机制。方法采用RT-PCR及Western印迹检测SFN诱导Caco-2细胞株UGT1A及其同功型的表达,高效液相色谱法测定UGT1A的催化活性;用共聚焦激光显微镜观察核转录因子Nrf2的转位。结果（1）10~35μmol/LSFN处理组UGT1AmRNA相对系数与对照组比较差异有统计学意义（P＜0·05）。UGT1AmRNA表达量与SFN的剂量呈显著正相关（r=0·79,P＜0·01）。25μmol/LSFN处理组的诱导作用随着时间延长而增强,呈时间依赖性。25μmol/LSFN处理组与对照组之间UGT1A1（P=0·006）、UGT1A8（P=0·017）、UGT1A10（P=0·008）表达的差异有统计学意义。（2）10~30μmol/LSFN作用于结肠腺癌Caco-2细胞株24h,随着浓度的增加,UGT1A蛋白带的灰度值比值增加。与对照组相比,差异均有统计学意义。（3）在SFN处理组N-OH-PhIP-N2葡萄糖醛酸甙的峰值明显增高。（4）共聚焦激光显微镜观察在对照组细胞质中看到Nrf2红色荧光标记,而在25μmol/LSFN处理24h组的细胞可在胞核内看到强烈的红色荧光,表示这种信号转导因子的细胞内转位。结论（1）小剂量的SFN能诱导UGT1A及其同工型UGT1A1、1A8、1A10mRNA表达,UGT1A蛋白表达增加,对杂环胺的葡萄糖醛酸结合能力增强。（2）SFN有可能通过核转录因子Nrf2激活UGT1A基因的转录表达。