骨髓间充质干细胞对缺氧诱导心肌细胞凋亡的保护作用

摘要

目的探讨骨髓间充质干细胞（MSC）对缺氧诱导心肌细胞凋亡的保护作用及可能机制。方法分离培养成年大鼠 MSC 和乳鼠心肌细胞,将培养的乳鼠心肌细胞进行缺氧处理后,加入MSC 或其条件培养液继续在无氧（95%N2+5%CO2,持续缺氧组）或正常氧（缺氧/复氧组）条件下共培养72 h,采用 Hoechst 细胞核染色,计算凋亡细胞百分率;采用蛋白质免疫印迹法检测凋亡相关蛋白 Bcl-2和 Bax 的变化。结果持续缺氧可以诱导心肌细胞凋亡,凋亡率为51.6%±2.4%,与 MSC或其条件培养液共培养,心肌细胞凋亡率显著减低,分别为15.1%±5.4%和24.0%±4.2%（均 P＜0.01）;缺氧/复氧损伤可以引起心肌细胞凋亡,凋亡率为20.9%±2.7%,心肌细胞与 MSC 共培养,凋亡率显著减低（11.5%±3.7%,P＜0.05）;心肌细胞与 MSC 条件培养液共培养,凋亡率略有减低（20.1%±4.2%,P＞0.05）。蛋白质免疫印迹显示凋亡时心肌表达 Bax 水平较高,与 MSC 或其条件培养液共培养时,Bax 表达水平呈不同程度降低,与心肌细胞凋亡发生率减低一致,Bcl-2无明显变化。结论 MSC 对体外缺氧诱导的心肌细胞的凋亡有保护作用,其作用机制可能是通过细胞间直接接触和旁分泌细胞因子,影响了 Bcl-2家族部分蛋白分子在心肌细胞的表达。