HIF-2α调控FoxM1对低氧大鼠肺动脉平滑肌细胞增殖的影响

摘要

目的探讨低氧诱导因子2α（HIF-2α）基因调控叉头框M1蛋白质（FoxM1）蛋白表达对低氧大鼠肺动脉平滑肌细胞（PASMC）增殖的影响。方法构建HIF-2α过表达慢病毒载体（LV-HIF-2α）和沉默RNA（siRNA）, 并分别在常氧和低氧条件下转染大鼠PASMC, 其中常氧组分成常氧对照组、常氧+LV-HIF-2α空载组、常氧+LV-HIF-2α组;低氧组分成低氧对照组、低氧+siRNA-HIF-2α空载组、低氧+ siRNA-HIF-2α组, 采用Western印迹检测HIF-2α及其对下游FoxM1蛋白、细胞周期蛋白D1（cyclinD1）及细胞增殖相关Aurora A蛋白表达影响。5-乙炔基-2′-脱氧尿苷（EdU）细胞增殖检测过表达和抑制HIF-2α表达对大鼠PASMC增殖能力的影响。结果常氧+LV-HIF-2α组HIF-2α表达均显著高于常氧对照组和常氧+LV-HIF-2α空载组（0.17±0.02比0.09±0.01和0.07±0.00）, 而低氧+siRNA-HIF-2α组PASMC中HIF-2α表达均显著低于低氧对照组和低氧+siRNA-HIF-2α空载组（0.28±0.01比0.35±0.02和0.30±0.01）（均P＆0.05）;常氧+LV-HIF-2α组FoxM1蛋白、cyclinD1及细胞增殖相关Aurora A蛋白表达均显著高于常氧对照组和常氧+LV-HIF-2α空载组（分别为0.40±0.03比0.24±0.01和0.30±0.01, 0.22±0.02比0.09±0.01和0.08±0.02, 0.29±0.02比0.04±0.01和0.07±0.01）（均P＆0.05）;低氧+siRNA-HIF-2α组FoxM1蛋白、cyclinD1及Aurora A蛋白表达均显著低于低氧对照组和低氧+siRNA-HIF-2α空载组（分别为0.23±0.01比0.36±0.02和0.32±0.01, 0.15±0.01比0.31±0.01和0.28±0.03, 0.14±0.02比0.33±0.03和0.27±0.02）（均P＆0.05）;常氧对照组PASMC的EdU阳性表达率显著低于常氧+LV-HIF-2α组[（30.77±2.43）%比（55.56±3.01）%], 而低氧对照组显著高于低氧+siRNA-HIF-2α组[（65.28±3.21）%比（44.64±2.78）%]（均P＆0.05）。结论 HIF-2α调控FoxM1表达明显增加而促进低氧大鼠肺动脉平滑肌细胞增殖。