插入烟草叶绿体启动基因片段的重组质粒转化大肠杆菌和枯草...

摘要

大肠杆菌(E.coli)N100携带的pK01-26质粒插入烟草(Nicotiana tobacHm var.)叶绿体启动基因片段的重组质粒。该质粒以大肠杆菌HB101为受体可以再转化,转化频率为4.93×10^(-6),以枯草杆菌168为受体不能实现转化。上述两种受体菌株的原生质体,经处理,再生细胞壁后,分别获得转化子。经原生质体转化,以大肠杆菌HB101为受体的转化频率为2.7×10^(-4),而枯草杆菌168为受体也能转化,转化频率为2.6×10^(-5)。以HB101为受体的转化子在麦康凯半乳糖选择平板上呈红色菌落。证明pKO1-26质粒在新受体中叶绿体启动基因仍可启动半乳糖激酶基因表达。获得的转化菌株经测定,以HB101为受体的,遗传性稳定;而以168为受体的,部分菌株遗传性稳定。