末端限制性片段长度多态性(T-RFLP)技术的系统误差分析

摘要

T-RFLP技术是一种新近发展起来的分析微生物多样性的分子生物学方法,与其它多样性分析技术相比,具有一些不可比拟的优势,但T-RFLP技术操作流程将对结果产生系统误差的程度鲜有报道.实验以紫茎泽兰入侵过程中4种土样中的nifH基因多样性分析为例.进行了只改变T-RFLP操作流程中一个步骤的3次重复分析,结果表明:限制性内切酶种类对T-RFLP分析结果的可重复性影响最大,PCR次之,而毛细管电泳对结果的可重复性几乎没有影响.