cry8E启动子指导的非晶体蛋白GabR在苏云金芽胞杆菌HD73菌株中的表达

摘要

[目的]利用cry8E基因启动子指导的高效表达载体pHT315-8E21b,构建一个能够在苏云金芽胞杆菌(Bacillus thuringiensis,简称Bt)中正确表达非晶体蛋白GabR的重组菌株.[方法]将苏云金芽胞杆菌中的功能基因gabR装载到cry8E基因启动子指导的高效表达载体pHT315-8E21b上,转入到HD73-无晶体突变株后获得重组菌株HD-8E-gabR.通过SDS-PAGE和凝胶阻滞等方法对GabR蛋白的表达和功能进行分析.[结果]通过SDS-PAGE及蛋白定量等方法首次证明了在Bt表达体系中cry8E基因启动子指导的高效表达载体能够表达非晶体蛋白GabR,且通过碱裂解的方法可以提高GabR蛋白在Bt系统中的溶解性.进一步凝胶阻滞试验证明GabR能与其调控启动子PgabT结合.[结论]证明了cry8E基因启动子指导的Bt表达系统具有大量表达非晶体类蛋白的能力.