游动放线菌8-22中treY基因敲除对于降低阿卡波糖C组分的作用

摘要

[目的]在阿卡波糖发酵过程中,C组分的存在严重影响阿卡波糖产品的质量,研究拟通过基因改造降低阿卡波糖C组分.[方法]通过构建treY同框敲除质粒pUAmT-YUD,以接合转移方法将其转入阿卡波糖工业菌株8-22,经同源重组将trey基因内部编码182个氨基酸的序列敲除,从而得到treY基因失活的突变株Y810.[结果]发酵结果显示突变菌株中C组分较出发菌株下降了约10倍,而阿卡波糖本身的效价末受影响.[结论]敲除treY基因可大幅降低阿卡波糖C组分的含量.研究的实施将大大简化阿卡波糖的纯化步骤,提升产品品质,降低生产成本,从而提高工业化生产的市场竞争力.研究同时还对游动放线菌的接合转移条件进行了优化,大大提高了转化效率.