铜绿假单胞菌二氢硫辛酸酰胺脱氢酶的重组表达及其与脂蛋白(a)的相互作用

摘要

[目的]二氢硫辛酸酰胺脱氢酶(Dihydrolipoamide dehydrogenase,Lpd)是铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)表面的一种纤溶酶原(Plasminogen,Plg)受体,旨在研究Lpd与脂蛋白(a) [Lipoprotein(a),Lp(a)]以及Plg之间的相互作用.[方法]用大肠杆菌表达rLpd及其突变分子(rLpdK476A、rLpdK477A,rLpd△KKR),用酶联免疫吸附实验(ELISA)、亲和色谱层析及Westernblot等技术检测rLpd及其突变分子与Lp(a)、Plg的相互作用.[结果]ELISA及亲和色谱层析实验结果表明,rLpd可以与Lp(a)结合但不与LDL结合,Lp(a)与rLpd△KKR的结合能力显著低于其与rLpd的结合能力.1 mmol/L的赖氨酸类似物6-氨基己酸(EACA)对rLpd与Lp(a)的结合有显著的抑制作用.1 000 μg/L的Lp(a)对rLpd与Plg的结合起到显著的抑制作用.[结论]Lpd能够与Lp(a)特异性结合,其476和477两个相邻的赖氨酸残基是与Lp(a)结合的主要位点,Lp(a)可以竞争性地抑制rLpd与Plg的结合.