恩拉霉素生产菌株的遗传改造

摘要

[目的]提高杀真菌素链霉菌发酵生产恩拉霉素的产量.[方法]利用定点突变技术,对恩拉霉素生产菌株杀真菌素链霉菌F1中影响细胞次级代谢及抗生素合成的核糖体S12蛋白的编码基因rpsL进行改造,将第43位的赖氨酸(Lys)分别替换为天冬酰胺(Asn)和精氨酸(Arg),并对改造菌株L-M1 (Asn43)和L-M2(Arg43)的生长特性、抗生素合成以及摇瓶发酵性能进行研究.[结果]与野生型菌株相比,改造菌株的生长特性及生理生化特性均发生了明显的改变:产孢周期明显缩短,野生型菌株在MS培养基中,28℃下需要培养5-7 d后才能产生孢子,而在相同条件下,改造菌株3d后就能产生大量的孢子;恩拉霉素产量相对提高,摇瓶发酵条件下,改造菌株L-M1(Asn43)和L-M2(Arg43)的恩拉霉素产量分别可达到1 334 U/mL和1 456 U/mL,与野生型菌株F1相比分别提高了11.9％和22.1％.[结论]通过遗传改造,恩拉霉素的产量得到了提高,为其他位点的遗传改造提供了可行性.