Stefin B调控巨噬细胞极化对肝癌细胞增殖、迁移、侵袭及上皮间质转化的影响

摘要

目的 探讨stefin B(CSTB)调控巨噬细胞极化对肝癌细胞增殖迁移侵袭及上皮间质转化(epithelial-mesenchy-mal transition,EMT)的影响.方法 诱导人单核细胞系THP-1极化成未分化巨噬细胞(M0)、经典活化的巨噬细胞(M1)、替代性活化的巨噬细胞(M2)和肿瘤相关巨噬细胞(tumor associated macrophage,TAM);构建慢病毒stefin B(LV-CSTB)及对照空载体病毒(LV-NULL),感染各亚型巨噬细胞,ELISA法检测IL-10和IL-12分泌;病毒感染各亚型巨噬细胞后的上清分别制备成条件培养液用于培养MHCC97H细胞,CCK-8法、划痕法和小室法分别检测细胞的增殖、迁移和侵袭能力,RTPCR和Western blotting法分别检测细胞E-cadherin、N-cadherin、β-catenin及Twist的mRNA和蛋白表达.结果 LV-CSTB感染M0、M2、TAM亚型细胞的上清中IL-10明显增加,感染M1后上清中IL-12明显增加;LV-CSTB感染M0、M2、TAM亚型的条件培养液作用时,MHCC97H细胞的增殖、迁移和侵袭能力均明显增强,E-cadherin的mRNA和蛋白表达明显下降,N-cadherin、β-catenin(M0除外)及Twist的mRNA和蛋白表达明显上升.结论 Stefin B调控巨噬细胞M0向M2亚型极化,stefin B介导M0、M2、TAM促进肝癌细胞增殖、迁移、侵袭及EMT.