不同无土栽培基质微生物DNA提取方法研究

摘要

用4种DNA提取方法对3种栽培基质中微生物的DNA浓度、腐殖酸去除率、16S rDNA的PCR扩增、扩增片段限制性内切酶和变性梯度凝胶电泳结果进行比较。结果表明:采用含CaCO3的缓冲液预洗,用CTAB缓冲液和蛋白质酶K共同作用以裂解细胞,同时添加2%CaCl2可有效去除腐殖酸;用PEG 8000沉淀DNA和Sephadex G-200纯化,可提高DNA质量;所得DNA适用于PCR扩增及ARDRA技术的限制酶切分析;在DGGE分析中此方法更能显示微生物种群的多样性。