BTK与PKCβ在多发性骨髓瘤中表达及调控的信号通路机制研究

摘要

目的:分析Bruton酪氨酸激酶(BTK)与蛋白激酶Cβ(PKCβ)在多发性骨髓瘤患者肿瘤细胞(MM)和正常人骨髓血淋巴细胞中的表达,探究它们之间的调控关系以及对NF-κB的影响.方法:运用qRT-PCR和Western blotting检测BTK与PKCβ的表达情况.利用siRNA降低BTK的表达,使用抑制剂PCI-32765抑制BTK,在过表达BTK的同时抑制PKCβ,运用qRT-PCR、Western blotting检测PKCβ的变化,Western blotting检测p65核内外分布情况.结果:在30例初诊MM患者标本中,BTK的阳性率为30％,与正常人骨髓血标本相比(阳性率为5％)差异具有统计学意义;PKCβ的阳性率为46.67％,与正常人骨髓血标本相比(阳性率为15％)差异具有统计学意义.在8226细胞中降低BTK的表达或者抑制BTK后,PKCβ的mRNA和蛋白表达下调,而p65的总蛋白表达虽无变化,但是核内的p65下降.过表达BTK可使PKCβ表达上调和p65核内分布增加,但是PKCβ抑制剂LY333531可逆转BTK过表达导致的NF-κB过度激活.结论:BTK与PKCβ在多发性骨髓瘤患者的肿瘤细胞中呈高表达;BTK通过调控PKCβ激活NF-κB.