丁卡因通过MDM2基因下调Survivin蛋白抑制黑色素瘤生长

摘要

目的 研究局麻药丁卡因对黑色素瘤生长的影响及其可能机制.方法 一系列梯度浓度的丁卡因(0.1-0.6 mmol/L)分别干预黑色素瘤细胞(A375和B16)24 h,MTT实验检测黑色素瘤的细胞活力,细胞集落实验检测黑色素瘤的增殖能力,Western blot检测细胞凋亡抑制蛋白Survivin及其上游基因MDM2表达的变化.取12只6-8周龄的BALB/c小鼠于背部建立皮下黑色素瘤模型,随机分为对照组(n=6)和丁卡因组(n=6).丁卡因组经腹腔予以丁卡因处理,对照组经腹腔予以等量生理盐水.观察并记录肿瘤生长情况,处理结束后取肿瘤组织行免疫组化染色检测Survivin的表达变化.结果 丁卡因可显著抑制黑色素瘤细胞A375和B16的细胞活力(P<0.001),且呈浓度依赖性,IC50分别为0.41 mmol/L和0.16 mmol/L.与对照组相比,丁卡因组黑色素瘤细胞集落生长明显被抑制(P<0.001),Survivin和MDM2的表达明显下调(P<0.001).在动物试验中,丁卡因组小鼠肿瘤体积及质量明显小于对照组(P<0.05),肿瘤组织免疫组化染色显示丁卡因组Survivin阳性表达相较于对照组表达减少(P<0.001).结论 局麻药丁卡因在细胞及动物水平上均能明显抑制黑色素瘤的生长,这可能与其通过MDM2下调Survivin的表达相关.