GPX4对erastin诱导的H9C2细胞脂质过氧化和铁死亡的影响及其机制

摘要

目的探讨谷胱甘肽过氧化酶4（GPX4）以及核因子红细胞2相关因子2（NRF2）对erastin诱导的H9C2细胞脂质过氧化和铁死亡的影响及其机制。方法将H9C2细胞按照实验要求分为A～K组,A组为对照组,B～K组为分别经erastin（5μmol/L）、erastin（5μmol/L）+Fer-1（5μmol/L）、erastin（5μmol/L）+DFO（100μmol/L）、erastin（5μmol/L）+Z-VAD（10μmol/L）、erastin（5μmol/L）+Nec-1（50μmol/L）、erastin（5μmol/L）+empty vector、erastin（5μmol/L）+GPX4、erastin（5μmol/L）+siGPX4-scr、erastin（5μmol/L）+si-GPX4、erastin（5μmol/L）+NRF2处理组。分别检测A～C组H9C2细胞中GPX4、NRF2 mRNA及蛋白的相对表达水平,同时检测A～K组H9C2细胞的脂质过氧化和铁死亡情况。结果 A～C组H9C2细胞GPX4、NRF2 mRNA和蛋白相对表达水平比较均有显著差异（F=8.277～42.570,P＜0.05）,其中C组细胞中GPX4、NRF2 mRNA和蛋白相对表达水平明显高于B组（t=3.320～9.803,P＜0.05）;各组H9C2细胞的死亡率及脂质ROS、MDA含量进行比较,A～F组均有显著差异（F=22.380～259.500,P＜0.05）,其中C、D组较B组明显降低（t=4.056～45.500,P＜0.05）;A、B、G、H组比较差异有显著性（F=4.069～488.900,P＜0.05）,其中H组较G组明显降低（t=2.044～16.750,P＜0.05）;A、B、I、J组比较差异有显著性（F=19.880～363.200,P＜0.05）,其中J组较I组明显升高（t=2.925～10.280,P＜0.05）;A、B、G、K组比较差异有显著性（F=3.786～99.120,P＜0.05）,其中K组较G组明显降低（t=1.873～8.315,P＜0.05）。结论 GPX4和NRF2均参与了调控erastin诱导的心肌细胞脂质过氧化和铁死亡过程,其中NRF2可能是通过GPX4发挥转录调控作用的。