小白菊内酯对胃癌细胞BGC-823的抑制作用及其机制

摘要

目的研究小白菊内酯(PN)对胃癌细胞BGC-823的抑制作用及其机制。方法将BGC-823细胞分为DMSO组和PN组,DMSO组常规进行细胞培养,PN组则采用不同浓度的PN处理细胞。两组细胞采用CCK-8技术检测不同时间点细胞活力的变化,采用克隆形成实验检测细胞增殖能力的变化,采用流式细胞术检测细胞不同周期比例及凋亡水平,采用荧光实验检测细胞内活性氧簇(ROS)生成水平,采用Western Blot方法检测细胞周期及凋亡相关蛋白水平的变化。结果与DMSO组比较,随着PN浓度的增加BGC-823细胞的活力及增殖能力均下降(F=283.80、312.60,P<0.01)。24h时,PN组的总凋亡比例与DMSO组相比明显升高(t=27.57,P<0.01),且随着处理时间的延长凋亡相关蛋白半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(caspase)8、caspase9和caspase3剪切型的表达明显增加(F=228.10～2 024.00,P<0.01)。与DMSO组相比较,PN组细胞周期被阻滞在G1期(t=4.22、7.44,P<0.05);而且随着处理时间的延长,细胞周期蛋白(Cyclin)D1及CyclinE1水平明显下降(F=159.40、25.40,P<0.01),P53及P21蛋白表达水平明显升高(F=53.74、73.03,P<0.01)。24h时,PN组细胞内ROS生成水平较DMSO组明显升高(t=10.92,P<0.01);而且随着处理时间的延长,细胞核内c-Myc基因、转录因子E2F1、核因子κB(NF-κB)以及磷酸化的信号传导及转录激活因子3(p-STAT3)蛋白的表达水平明显下降(F=306.90、1 067.00,t=8.72、9.15,P<0.01)。结论 PN对BGC-823细胞增殖能力呈剂量依赖性抑制,对细胞周期产生阻滞并诱导细胞凋亡,这种抗肿瘤作用可能是通过抑制STAT3-c-Myc-E2F1发挥作用的。