葛根素抑制非小细胞肺癌A549细胞增殖、侵袭和迁移的机制探讨

摘要

目的:探讨葛根素对非小细胞肺癌A549细胞增殖、侵袭和迁移的作用及其机制。方法:不同浓度葛根素处理非小细胞肺癌A549细胞后,采用CCK-8法检测葛根素对非小细胞肺癌A549细胞增殖抑制作用及半数抑制浓度(half-inhibitory concentration,IC_(50));显微镜下观察葛根素对非小细胞肺癌A549细胞形态的影响;平板克隆实验检测葛根素对非小细胞肺癌A549细胞体外生长能力的影响;Annexin V/PI双染流式细胞术检测肺癌细胞凋亡率;Transwell实验和细胞划痕愈合实验检测葛根素对非小细胞肺癌A549细胞侵袭和迁移能力的影响;Western blot实验检测葛根素作用于非小细胞肺癌A549细胞后MMP-2、MMP-9、p-p65、p65蛋白表达的变化。结果:与对照组相比,葛根素呈剂量依赖性(0.8 mmol/L、1.6 mmol/L、3.2 mmol/L)抑制A549细胞的细胞活力(P<0.05),葛根素作用于A549细胞48 h后的IC_(50)为(1.917±0.119)mmol/L。葛根素能够明显改变A549细胞的形态,表现为细胞数目减少,细胞皱缩变圆,细胞贴壁能力减弱,细胞间距变大,细胞丝状伪足减少。与对照组相比,2 mmol/L和3 mmol/L的葛根素均能明显抑制A549细胞的集落形成能力(P<0.05)。与对照组相比,葛根素呈剂量依赖性(1 mmol/L、2 mmol/L、3 mmol/L)诱导A549细胞凋亡(P<0.05)。与对照组相比,2 mmol/L和3 mmol/L的葛根素均能明显抑制A549细胞侵袭能力(P<0.05)。与对照组相比,葛根素呈剂量依赖性(1 mmol/L、2 mmol/L、3 mmol/L)抑制A549细胞迁移能力(P<0.05)。与对照组相比,葛根素呈剂量依赖性(1 mmol/L、2 mmol/L、3 mmol/L)抑制A549细胞中MMP-2蛋白、MMP-9蛋白表达和降低p-p65/p65的比值(P<0.05)。结论:葛根素可能通过NF-κB信号通路抑制肺癌A549细胞增殖、侵袭和迁移能力。