结直肠癌中miR-182-5 p通过靶向Tiam1抑制肿瘤血管新生

摘要

目的:探讨结直肠癌中miR-182-5p是否可以通过靶向Tiam1抑制肿瘤血管新生.方法:选取人正常结肠上皮细胞与结直肠癌细胞,用qPCR检测细胞系中miR-182-5 p和Tiam1 mRNA的表达.将对照mimics过表达载体、miR-182-5 p mimics过表达载体、对照siRNA过表达载体、Tiam1 siRNA过表达载体及Tiam1过表达载体分别转染至HT-29细胞中,用双荧光素酶报告基因实验验证miR-182-5 p与Tiam13'UTR的靶向关系,用工程化肿瘤细胞上清培养人脐静脉内皮细胞(HUVEC),通过划痕愈合实验及小管生成实验分别检测细胞的迁移及小管生成能力,用Western blot检测相关蛋白的表达,并通过小鼠体内移植瘤模型检测血管新生.结果:miR-182-5p在HT-29细胞中显著低表达(P<0.01),而Tiam1在HT-29细胞中显著高表达(P<0.001),且Tiam1是miR-182-5p的靶标.迁移实验结果表明,转染miR-182-5p mimics的HT-29细胞上清可以抑制HUVEC的迁移能力(P<0.01),Tiam1基因沉默的HT-29细胞上清也可以抑制HUVEC的迁移能力(P<0.001).小管生成及小鼠体内实验表明,过表达miR-182-5p及沉默Tiam1可以有效抑制肿瘤血管生成(P<0.01).结论:miR-182-5p可以靶向Tiam1,通过抑制Tiam1的表达水平,从而抑制结直肠癌中的血管新生.