耐阿霉素食管癌细胞株EC9706/ADM的EMT-MET现象及机制

摘要

目的:建立耐阿霉素食管癌细胞株EC9706/ADM,探讨耐药细胞的EMT-MET现象及机制.方法:采用中等浓度间歇法建立耐阿霉素食管癌细胞株EC9706/ADM,用MTT法测定细胞的耐药指数及多药耐药性,Transwell小室实验检测耐药细胞的体外侵袭能力,实时荧光定量PCR和Western blot检测细胞在不同黏附时间EMT相关分子标志物E-cadherin、N-cadherin、Vimentin、Fibronectin和基质金属蛋白酶MMP2、MMP7、MMP9等的表达.结果:成功建立耐阿霉素食管癌细胞株EC9706/ADM,细胞的耐药指数为32.2,对顺铂、5-氟尿嘧啶、环磷酰胺产生交叉耐药性.与EC9706亲本细胞相比,EC9706/ADM细胞体外侵袭能力明显增强.黏附实验中,在黏附早期,耐药细胞E-cadherin表达降低而N-cadherin表达显著增高,黏附后期,E-cadherin表达升高而N-cadherin表达显著降低,基质金属酶在细胞黏附过程中表达均升高.结论:食管癌耐阿霉素细胞EC 9706/ADM侵袭能力增强,可能与基质金属酶表达量增高和细胞发生EMT-MET转换相关.