Hedgehog信号通路通过协同抑制Cyclin D1增强Let-7a对三阴性乳腺癌肿瘤细胞的抑制作用

摘要

目的:研究Hedgehog信号通路在Let-7a抑制三阴性乳腺癌肿瘤进展过程中的作用.方法:应用MTT实验及流式实验检测Hedgehog通路对Let-7a所引起的乳腺癌细胞凋亡的影响.以Western blot实验,luc-assay实验验证Hedgehog信号通路所引起的和Let-7a有关的下游信号通路的变化.免疫荧光实验检测Hedgehog信号通路抑制剂环巴胺引起的Let-7a对乳腺癌干细胞表型改变的影响,免疫组化实验检测Hedgehog通路激活的和Let-7a有关的下游分子在不同分期的乳腺癌组织中的表达.结果:抑制Hedgehog信号通路可以抑制MDA-MB-231细胞和BT-20细胞的增殖,并且有助于增敏Let-7对MDA-MB-231和BT-20细胞的相关作用.Let-7a对TNBC细胞中Cyclin D1水平的抑制作用虽然不是十分显著,但Hedgehog通路抑制剂可以明显增强其相关作用,我们通过Western blot,luc-assay和免疫荧光实验对这一作用进行了验证.此外,研究结果还显示环巴胺可以抑制MDA-MB-231和BT-20细胞中的ALDH1(+)亚群细胞,并可以加强Let-7a对TNBC细胞自我更新能力的抑制作用.结论:Hedgehog通路的抑制剂可以增强Let-7 miRNA在三阴性乳腺癌中所引起的肿瘤抑制作用.