CD155通过Ras/Erk通路促进肺腺癌细胞增殖及抑制其凋亡的分子机制

摘要

cqvip:目的:研究CD155通过调控Ras/Erk通路对肺腺癌细胞活性、增殖、凋亡的影响,并探讨其作用的分子机制。方法:通过慢病毒转染法构建过表达或敲低CD155的人肺腺癌H23和H522细胞株,qRT-PCR检测肺腺癌细胞中CD155 mRNA表达水平,CCK-8法检测细胞活力,免疫荧光法测定细胞增殖和凋亡水平;Western blot检测PCNA、caspase-3、Ras、Erk1蛋白的表达及活化水平;小分子药物FTI 277或FR 180204处理过表达CD155的H23和H522细胞抑制Ras及Erk通路,检测对细胞活性、增殖、凋亡的影响;采用慢病毒共转染的方法构建CD155与SPRY2共同过表达的H23细胞系,免疫共沉淀法检测细胞中SPRY2、CD155蛋白间的结合关系,以同样的方法检测对细胞活性、增殖、凋亡的影响。结果:慢病毒转染肺腺癌H23和H522细胞可上调或下调细胞中CD155的表达,差异具有统计学意义(P <0. 05);CD155过表达可促进肺腺癌细胞活性、增殖及PCNA蛋白的表达,抑制细胞凋亡及caspase-3的活化,敲低CD155则表现出相反的作用,差异具有统计学意义(P <0. 05);CD155过表达可激活Ras和Erk1,敲低CD155则抑制Ras和Erk1的激活,差异具有统计学意义(P <0. 05);抑制Ras和Erk通路可抑制过表达CD155引起的细胞增殖及活性的促进作用,缓解过表达CD155诱导的细胞凋亡,差异具有统计学意义(P <0. 05);SPRY2过表达逆转CD155过表达对H23细胞增殖及活性的促进作用,抑制对Ras/Erk通路激活的促进作用,差异具有统计学意义(P <0. 05)。结论:CD155可通过提高Ras/Erk通路的激活程度,促进肺腺癌细胞在体外的增殖及活性,其作用机制可能是部分由CD155与SPRY2蛋白发生相互作用,降低了SPRY2蛋白对Ras/Erk通路的抑制作用引起的。