干扰MAP2基因表达对胶质瘤细胞生物学特性的影响

摘要

目的:通过RNA干扰降低胶质瘤细胞中MAP2表达后观察其对胶质瘤细胞生物学特性的影响.方法:RT-qPCR和Western blot测定胶质瘤细胞Hs683、U251中MAP2的基因和蛋白表达.构建shRNA MAP2质粒,转染胶质瘤细胞,筛选出MAP2低表达的胶质瘤细胞,并经Western blot验证.对转染后胶质瘤细胞行MTT检测细胞活性、PI-FACS检测细胞周期、Annexin V-APC单染法行细胞周期检测、Transwell实验检测细胞的迁移能力,并使用Western blot测定转染后胶质瘤细胞中α--管蛋白和乙酰化α-管蛋白的含量.结果:转染shRNA MAP2后胶质瘤细胞中MAP2的蛋白表达显著降低.分子生物学实验显示转染shRNA MAP2后胶质瘤细胞的活性降低、凋亡增加、细胞迁移能力下降、细胞周期有所变化但无特异性,代表微管稳固性的乙酰化α-管蛋白含量基本不变.结论:RNA干扰降低胶质瘤细胞Hs683、U251中MAP2表达后,能降低细胞活性、增加凋亡、降低细胞迁移能力,但这些变化似与微管的稳固性无关.