Survivin-shRNA对视网膜母细胞瘤HXO-RB44细胞自噬及凋亡的影响

摘要

目的:研究Survivin-shRNA对视网膜母细胞瘤HXO-RB44细胞自噬及凋亡的影响.方法:培养视网膜母细胞瘤HXO-RB44细胞,构建Survivin-shRNA载体.按照处理不同分为Survivin-shRNA组、GFP组和CON组.分别采用流式细胞术检测Survivin-shRNA对HXO-RB44细胞凋亡和细胞周期的影响,应用MTT法检测Survivin-shRNA对HXO-RB44细胞活性的影响,Western blot法检测Survivin-shRNA对HXO-RB44细胞自噬相关蛋白LC3、p62与mTOR表达的影响.结果:流式细胞术结果表明,与Control组和GFP组相比,Survivin-shRNA组细胞凋亡率增加,差异有统计学意义(P＜0.05);随着作用时间的延长,S期出现阻滞,48 h阻滞最强,显著高于对照组(P＜0.05).MTT结果发现Survivin-shRNA可抑制HXO-RB44细胞增殖活性,与Control组和GFP组相比,差异有统计学意义(P＜0.05);Western blot结果发现,与对照组相比,LC3表达量显著增加(P＜0.01);而mTOR表达量降低(P＜0.01).结论:Survivin-shRNA可促进视网膜母细胞瘤HXO-RB44细胞的凋亡和自噬水平,进而特异性杀伤肿瘤细胞.