lncRNA BCAR4在肝癌细胞系中的表达及对增殖、凋亡和迁移的影响

摘要

目的:观察肝癌细胞系中长链非编码RNA BCAR4(lncRNA BCAR4)的表达,及对肝癌细胞增殖、凋亡和迁移的影响,并探讨其机制.方法:采用荧光定量PCR技术(qRT-PCR)检测肝癌细胞系Huh7、HepG2、SMMC-7721和正常肝细胞系L02中lncRNA BCAR4的表达.将Huh7细胞系分为BCAR4-siRNA组、NC-siRNA组和Blank组,BCAR4-siRNA组和NC-siRNA组经LipofectamineTM 2000分别转染BCAR4-siRNA序列和NC-siRNA序列,Blank组以PBST为阴性对照.CCK-8法和流式细胞数测定细胞增殖和凋亡,细胞划痕实验测定迁移能力.Western blot测定细胞周期相关蛋白(Cyclin D1)和凋亡相关蛋白Bcl-2和Bax的表达.结果:肝癌细胞系Huh7、HepG2、SMMC-7721中lncRNA BCAR4的表达显著高于正常肝细胞系L02(P<0.05).转染BCAR4-siRNA后,Huh7的lncRNA BCAR4表达下调(P<0.01).CCK-8示:转染72 h及96 h后,BCAR4-siRNA组vs NC-siRNA组的OD 450 nm值分别为0.71±0.07 vs 0.92±0.10(P<0.05)及0.93±0.08 vs 1.37±0.11(P<0.01).BCAR4-siRNA组和NC-siRNA组细胞凋亡率分别为(17.52±3.21)％和(4.69±1.56)％(P<0.01).BCAR4-siRNA组细胞划痕愈合率为(19.65±2.41)％,显著低于NC-siRNA组的(47.50±5.88)％(P<0.05).与NC-siRNA组比较,BCAR4-siRNA组Cyclin D1、Bcl-2蛋白表达下调,分别为0.27±0.03 vs 1.0±0.05(P<0.01)、0.48±0.04 vs 1.0±0.04(P<0.05),Bax蛋白表达上调,为2.83±0.19 vs 1.0±0.03(P<0.01).结论:lncRNA BCAR4高表达于肝癌细胞系,敲低lncRNA BCAR4的表达可抑制肝癌细胞增殖、迁移,并促进凋亡,其机制可能与Cyclin D1和Bcl-2蛋白下调表达,Bax蛋白表达上调表达有关.