应用DNA微阵列研究斑蝥酸钠诱导K562细胞凋亡前后的基因变化

摘要

目的: 研究斑蝥酸钠体外诱导人红白血病K562细胞凋亡的作用,应用DNA微阵列技术探讨K562细胞凋亡过程中基因表达的变化.方法: 用不同浓度的斑蝥酸钠处理K562细胞,运用MTT染色观察、DNA凝胶电泳检测细胞凋亡,并提取斑蝥酸钠作用K562细胞前后的总RNA,逆转录成eDNA,分别用cy3/Cy5标记对照组和处理组,与含162个cDNA片段的K562表达谱芯片杂交.结果: 斑蝥酸钠强烈抑制K562细胞生长,2.5μg/ml的斑蝥酸钠即可诱导细胞凋亡.K562细胞经斑蝥酸钠作用后,大部分基因片段的表达都有所降低,其中37个基因片段的表达降低较为显著(CyS/Cy3<0.5).这些表达下调的基因片段包括转导因子、tRNA合成酶、代谢酶、信号通路蛋白、激酶等.结论: 斑蝥酸钠能有效诱导K562细胞凋亡,我们制备的K562细胞表达谱芯片可以成功地用于基因表达的研究.