miR-101、EZH2和MYC调控乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖能力的机制

摘要

目的:研究miR-101、EZH2和MYC对乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖的影响,并探究三者之间的调控机制.方法:以实时荧光定量PCR法检测三阴型乳腺癌组织及相应正常乳腺组织中miR-101、EZH2与MYC的表达,以及乳腺癌细胞系和正常乳腺细胞中miR-101的表达水平.以LipofectamineTM 2000将miR-101 mimics、EZH2 siRNA和MYC siRNA以及相应的阴性对照转染至MDA-MB-231细胞,Western blot法检测EZH2、MYC蛋白的表达,MTT法检测MDA-MB-231细胞的增殖能力.结果:相对于正常乳腺组织,三阴型乳腺癌组织中miR-101 mRNA的表达降低,而EZH2、MYC mRNA表达则显著升高;三阴型乳腺癌细胞中miR-101 mRNA的表达低于正常乳腺细胞MCF-10A.miR-101 mimics转染使MDA-MB-231细胞中miR-101 mRNA含量显著升高.miR-101过表达抑制EZH2、MYC的表达;EZH2敲减也抑制了MYC蛋白的表达.EZH2或MYC敲减可使miR-101 mRNA的表达显著升高.MTT实验结果示,miR-101过表达或敲减EZH2、MYC均可抑制MDA-MB-231细胞的增殖能力.结论:miR-101通过EZH2与MYC形成反馈环路调控MDA-MB-231细胞的增殖能力.