miR-218靶向SFMBT1影响肺癌细胞凋亡的研究

摘要

目的:探讨miR-218对肺癌细胞凋亡的影响.方法:qRT-PCR检测肺癌细胞A549、SPC-A1、H322和支气管黏膜上皮细胞16HBE中miR-218表达水平.以A549细胞为研究对象,预测miR-218的靶基因可能为含有4个mbt的Scm相关蛋白(SFMBT1),双荧光素酶报告基因鉴定靶基因,细胞转染miR-218模拟物、模拟物阴序列、SFMBT1小干扰RNA、小干扰RNA阴序列,以不处理的细胞为对照,qRT-PCR和Western blot检测转染后细胞中miR-218和SFMBT1表达,流式细胞术检测细胞凋亡情况.结果:miR-218在肺癌细胞中表达水平明显低于支气管黏膜上皮细胞16HBE,并且A549细胞中miR-218水平最低.miR-218模拟物和野生型的SFMBT1共转染后细胞荧光素酶活降低.转染miR-218模拟物后细胞中miR-218水平升高,细胞凋亡率升高,细胞中SFMBT1 mRNA和蛋白水平降低.转染SFMBT1小干扰RNA后细胞中SFMBT1 mRNA和蛋白水平降低,细胞凋亡率升高.结论:miR-218可以负调控靶基因SFMBT1的表达促进肺癌细胞凋亡.