氯化钴诱导化学性低氧对经HIF-1α 基因转染后的大鼠骨髓间充质干细胞生物学特性的影响

摘要

目的:探讨氯化钴(CoCl 2)诱导的化学低氧对经低氧诱导因子-1α(hypoxia-inducible factor-1α,HIF-1α)基因转染后的大鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)生物学特的影响.方法:第3代BMSCs以及转染有HIF-1α全长基因的第3代BMSCs,根据低氧诱导方式不同分为4组.BMSCs组、BMSCs-HIF-1α组:BMSCs或经HIF-1α基因转染后的BMSCs在H-35低氧工作站诱导的物理低氧环境下培养;BMSCs-CoCl 2组、BMSCs-HIF-1α-CoCl 2组:BMSCs或经HIF-1α基因转染后的BMSCs在CoCl 2诱导的化学低氧环境下培养.低氧培养8天后,Western blot测定各组内HIF-1α蛋白表达;流式细胞仪检测细胞周期内G 1/G2/S期细胞比例,统计增殖数(PI)和凋亡率.MTT法绘制细胞生长曲线,比较细胞数目.结果:与BMSCs-HIF-1α组和BMSCs-CoCl 2组比较,BMSCs-HIF-1α-CoCl 2组内HIF-1α蛋白表达上调(P<0.05),细胞周期内处于G 2期和S期的细胞数目增多(P<0.05),PI升高(P<0.05),细胞凋亡率下降(P<0.05).BMSCs-HIF-1α-CoCl 2组细胞在培养的3～8天内,细胞数目均多于其他三组细胞(P<0.05).结论:CoCl 2诱导的化学低氧上调了经基因转染后BMSCs内HIF-1α的蛋白表达,提高了细胞增殖能力,降低了细胞凋亡率.