淫羊藿苷对高糖环境下骨髓间充质干细胞凋亡及成骨分化的影响

摘要

目的 探讨淫羊藿苷对高糖环境下骨髓间充质干细胞(BMSCs)凋亡及成骨分化的影响.方法 将雄性4周龄SD大鼠颈椎离断法处死后,全骨髓贴壁法获取胫骨及股骨骨髓并培养BMSCs,噻唑蓝(MTT)比色法验证生长曲线.取第3代BMSCs,将细胞分为4组,即培养基含糖5.5 mmol/L的对照组、培养基含糖25 mmol/L的高糖组、培养基含淫羊藿苷25μmol/L和糖5.5 mmol/L的淫羊藿苷组,以及培养基含淫羊藿苷25μmol/L和糖25 mmol/L的联合组.将细胞以4×105个/孔的密度接种于96孔板,细胞完全贴壁后分组,每组设10个复孔,培养3 d后,流式细胞术测定细胞凋亡情况,实时聚合酶链反应法测定Ⅰ型胶原、骨桥蛋白及骨钙素基因的表达水平.结果经骨髓腔分离到的BMSCs浓度较大,显微镜下可见细胞呈胞浆丰满的圆形,培养12 d后,细胞融合率高,绝大多数细胞呈梭形,细胞生长曲线呈S形,符合BMSCs的生长特点.分组后3 d,与对照组比较,高糖组细胞凋亡率显著升高,Ⅰ型胶原、骨桥蛋白及骨钙素基因表达降低(P0.05);联合组细胞凋亡率升高,但低于高糖组(P<0.05),Ⅰ型胶原、骨桥蛋白及骨钙素基因表达降低,但高于高糖组(P<0.05).结论 淫羊藿苷可能通过抑制高糖环境下BMSCs的凋亡,促进成骨分化相关基因的表达,改善高糖环境下骨损伤的预后.