小麦组蛋白H1基因保守序列原核载体的构建及表达

摘要

采用PCR技术扩增TAT-Hlbs融合基因,并通过基因操作构建了融合基因的原核重组载体pET-28a-TAT-Hlbs.将阳性重组质粒转化至受体菌Rosseta(DE3)感受态细胞中,以IPTG诱导表达,表达产物经聚丙烯酰胺凝胶电泳检测和Western-blot检测.结果表明:重组菌能够表达目的蛋白,软件分析结果表明表达蛋白约占菌体蛋白的40%,上清表达量约为20%.上清蛋白经纯化后,Western-blot结果显示,His-Tag单克隆抗体可以很好地与所表达的蛋白带特异性结合.所获得的融合蛋白以高效胞质可溶形式表达.