毛细管电泳法检测含聚乙二醇的曲妥珠单抗的纯度

摘要

在抗体制剂中,处方中的聚乙二醇(PEG)会影响利用十二烷基硫酸钠毛细管电泳技术(CE-SDS)对蛋白进行纯度检测.当使用CE-SDS技术分析处方辅料中含有聚乙二醇8000(PEG8000)的曲妥珠单抗时,电泳谱图中的主峰后会出现由此分析方法造成的伪高分子量峰(伪HMW峰),对峰面积法计算蛋白纯度造成干扰.针对含质量分数为2%~7%PEG8000的曲妥珠单抗,尝试采用样品溶液替换、提高样品溶液制备时的变性孵育温度和在样品溶液中添加尿素的方式消除该伪HMW峰.结果表明,以下3种条件可用于消除由2%~7%PEG8000造成的伪HMW峰:提升样品溶液制备时的变性孵育温度至80℃;提升样品溶液制备时的变性孵育温度至70℃并在样品溶液中加入2mol/L尿素;提升样品溶液制备时的变性孵育温度至60℃并在样品溶液中加入4mol/L尿素.该研究拓展了毛细管电泳技术在单克隆抗体产品纯度分析的应用,并为其他抗体药物的纯度分析方法提供了参考.