影响球毛壳菌原生质体转化的因素

摘要

采用PEG介导的原生质体转化法研究了含有多菌灵抗性基因的质粒pRB129转化球毛壳菌的影响因素. 结果表明,最佳转化条件为:以1.0 mol/L 山梨醇作为渗透压稳定剂,20 mmol/L Ca2+和终质量分数为50%的PEG4000作为转化介质, 于25 ℃转化10 min,采用缓慢逐步稀释的方法,转化后1.5 d 筛选转化子,此时,转化率最高,且有较高的重复性,DNA平均转化率为5.6个/μg. 该结果对球毛壳菌其他性状的改进及其他丝状真菌的遗传转化具有重要参考价值.