姜黄素通过抑制HMGB1介导的自噬对棕榈酸诱导的卵巢颗粒细胞凋亡和类固醇生成能力的影响

摘要

目的:探究姜黄素对棕榈酸(PA)诱导的卵巢颗粒细胞损伤的影响及其可能的作用机制.方法:体外培养人卵巢颗粒细胞,CCK-8法检测细胞活力,ELISA法检测细胞上清液雌二醇(E2)含量,RT-qPCR法检测细胞HMGB1、CYP19A和CYP11A mRNA表达,流式细胞术检测细胞凋亡,Westem blotting法检测细胞HMGB1、Beclin1、LC3B和P62蛋白表达.结果:200μmol/L和400 μmol/LPA均能显著降低细胞活力、E2含量及CYP19A和CYP 11A mRNA表达,并升高细胞凋亡率(均P＜0.05).与对照组相比,PA组细胞活力、E2含量及CYP19A、CYP11A、P62表达均明显降低,而细胞凋亡率、HMGB1和Beclin1表达及LC3 Ⅱ/LC3 Ⅰ比值均明显升高(P＜0.05).与PA组相比,PA+姜黄素(2.5 μmol/L或5μmol/L)组细胞活力、E2含量、CYP19A、CYP11A、P62表达均明显升高,细胞凋亡率、HMGB1和Beclin1表达及LC3 Ⅱ/LC3 Ⅰ比值均明显降低(P＜0.05).过表达HMGB1可逆转姜黄素对PA诱导的卵巢颗粒细胞损伤的保护作用,并显著升高自噬相关蛋白的表达(P＜0.05).结论:姜黄素通过抑制HMGB1介导的自噬减轻PA诱导的卵巢颗粒细胞损伤.