极小种群喙核桃ISSR-PCR反应条件的建立与优化

摘要

cqvip:本文采用正交和单因素相结合的方法研究dNTPs、Mg2+、引物、Taq DNA聚合酶、模板DNA、循环次数及退火温度对喙核桃ISSR-PCR扩增效果的影响,以期为喙核桃遗传多样性评价、亲缘关系分析等研究奠定基础。结果表明:喙核桃最佳ISSR-PCR扩增体系及程序为20μL的反应体系含dNTPs 0.5 mmol/L、Mg2+ 3.0 mmol/L、引物0.8μmol/L、Taq DNA聚合酶2.5 U、模板DNA 45 ng、10×PCR Buffer 2.0μL。退火温度为54.4℃,循环次数为40。本研究建立的喙核桃ISSR-PCR反应体系稳定、可靠,可用于该物种遗传多样性分析。