奶牛单胚RT-PCR方法的建立

摘要

单个胚胎RT-PCR法在附植前胚胎发育基因的研究中具有重要作用.选取体外培养的4细胞期胚胎,用酸性台氏液除去透明带,胚胎裂解液裂解胚胎,以单胚和多胚mRNA作模板,用锚定引物和随机引物进行RT-PCR扩增,用特异引物进行持家基因GAPDH扩增作对照,分别用琼脂糖凝胶电泳和聚丙烯酰胺凝胶电泳比较单胚与多胚扩增结果,结果表明,单胚能够达到与多胚同样的结果,从单胚扩增物检出GAPDH,因此建立的单胚RT-PCR方法是有效的.