化痰活血益气方含药血清对异丙肾上腺素作用下大鼠H9c2细胞株Ⅰ、Ⅲ型胶原的影响

摘要

目的:探讨化痰活血益气方含药血清的抗心肌肥厚作用及对细胞间质Ⅰ、Ⅲ型胶原的影响。方法:分别制备生理盐水、化痰活血益气方低、中、高剂量(24.42、48.83、97.66 g/kg)及卡托普利(0.1 g/kg)含药血清。采用异丙肾上腺素(Isoproterenol,ISO)诱导的大鼠H9c2心肌细胞肥厚模型(10μmol/L,48 h)。各组细胞给予相应20%含药血清干预后,行免疫荧光染色并测定细胞表面积,BCA法检测细胞蛋白浓度,实时荧光定量RT-PCR检测胚胎基因心房利钠肽(atrial natriuretie peptide,ANP)、脑钠肽(brain natriuretic peptide,BNP)及Ⅰ、Ⅲ型胶原mRNA的表达,Western blot检测Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白的表达。结果:与正常对照组比较,模型组细胞的表面积、蛋白浓度、胚胎基因(ANP、BNP)mRNA及Ⅰ、Ⅲ型胶原mRNA和蛋白表达均显著升高(P<0.05)。与模型组比较,化痰活血益气方中剂量组上述指标均显著降低(P<0.05)。结论:(1)化痰活血益气方含药血清可有效改善ISO诱导的H9c2心肌细胞肥厚并降低Ⅰ、Ⅲ型胶原的表达;(2)在化痰活血益气方含药血清干预的各组细胞中,等效于成人给药剂量的中剂量组细胞改善最为显著,且效果优于卡托普利组。