基于性状鉴别和DNA条形码联用的小海马生药学研究

摘要

目的:采用性状鉴别和DNA条形码联用的方法对小海马药材进行生药学研究,为小海马的鉴别技术开发和遗传多样性研究提供数据支撑。方法:利用外观性状鉴别法对小海马典型性状进行研究;扩增测序小海马样品的COⅠ和16S rRNA序列,比较两个序列的碱基组成、GC含量、变异位点、信息位点等;基于MEGA 7.0中的K2P模型计算小海马的种内和种间遗传距离,NJ法构建小海马与市场常见海马品种的系统聚类树。结果:小海马最典型的性状鉴别特征为体型小,身体横向扁平,龙骨突出。14条小海马样品COⅠ、16S rRNA序列长度分别为649和573 bp,其中16S rRNA序列中的变异位点和信息位点均少于COⅠ序列。COⅠ和16S rRNA序列的最大种内遗传距离均远小于最小种间遗传距离,存在显著的条形码间隔区。NJ树结果显示COⅠ和16S rRNA序列均能将小海马与其他海马明显区分;小海马与三斑海马的亲缘关系最近。结论:COⅠ和16S rRNA序列均能将小海马与其他常见海马药材进行区分。COⅠ序列更适合作为鉴定小海马的标准条形码,16S rRNA可作为补充序列。基于性状和条形码联用的生药学研究方法能够准确提供小海马的性状和分子鉴别特征,为小海马的快速鉴定提供了新的方法,对控制和提高海马药材质量具有重要意义。