化痰消瘀方对大鼠胃癌前病变的疗效及对自噬相关基因的影响

摘要

目的:评估化痰消瘀方对大鼠胃癌前病变(PLGC)的疗效,观察其对自噬相关基因的影响。方法:采用甲硝基亚硝基胍(MNNG)综合饥饱失常及生理盐水灌胃方法诱导SD大鼠构建PLGC模型,成模动物分为模型组及化痰消瘀方低(0.1 g/kg)、中(0.2 g/kg)、高(0.3 g/kg)剂量组,以健康SD大鼠为正常对照组(n=15)。给药期间记录各组大鼠生存状况、体质量变化。给药8 w后,通过HE染色检测胃黏膜组织病理学;通过RT-PCR和免疫组化检测自噬相关基因微管相关蛋白3(light chains 3,LC3)、Beclin1、P62 mRNA和蛋白表达;采用免疫印迹方法检测自噬相关基因Beclin1、P62蛋白表达及LC3Ⅱ/LCⅠ水平。结果:正常对照组大鼠毛色白且有光泽,活动敏捷,食量正常。模型组大鼠毛色黄而无光,活动迟钝,形体偏瘦,且食量少,体质量降低;化痰消瘀方各剂量组大鼠的一般状态及体质量介于正常对照组与模型组之间。HE染色可见健康大鼠胃黏膜上皮组织完整,有少量免疫细胞散在分布其中;模型组大鼠胃黏膜腺体紊乱,可见透壁,基底部腺体上皮增生,固有层及黏膜肌层可见大量炎症细胞浸润,伴有较明显的水肿;化痰消瘀方各组胃黏膜病变情况介于正常对照组与模型组之间。与正常对照组比较,模型组大鼠胃组织中LC3、Beclin1 mRNA及蛋白表达显著降低,P62 mRNA及蛋白表达显著升高;与模型组比较,各给药组胃组织中LC3、Beclin1 mRNA及蛋白表达及3Ⅱ/LC3Ⅰ水平显著上调而P62 mRNA及蛋白显著下调。结论:化痰消瘀方治疗PLGC安全可行,其作用机理可能与调节胃黏膜中自噬相关基因LC3、Beclin1、P62的表达有关。