BMP4调控龟甲提取物促骨髓间充质干细胞的增殖作用

摘要

目地:观察骨形态发生蛋白4(bone morphogenetic proteins-4,BMP4)对龟甲提取物(Extracts from Testudinis Carapacis et Plastri,PTE)促骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)增殖的影响及作用机制。方法:PGL3-ID1分别和0、0.1、0.3、0.5、1μg/m L的p EGFP-BMP4用磷酸钙共沉淀法共转染大鼠MSCs,转染细胞每个剂量组均分为空白对照组和PTE组。空白对照组不加PTE,PTE组加入30μg/m L的PTE作用36 h,收集细胞萤光素酶报告基因检测ID1的表达。选取0.3μg/m L的p EGFP-BMP4与PGL3-ID1共转染。再将MSCs细胞分为对照组、PTE组、BMP4组和BMP4+PTE组。对照组和PTE组MSCs不做转染,PTE组MSCs加入30μg/m L的PTE作用36h;BMP4组MSCs共转染PGL3-ID1和p EGFP-BMP4;BMP4+PTE组MSCs共转染PGL3-ID1和p EGFP-BMP4,加入30μg/m L的PTE作用36 h。应用RT-PCR分别检测各组中ID1、BMP4、RARα的表达。结果:与空白对照组比较PTE组BMP4、ID1、RARα表达均显著增高;BMP4组BMP4、RARα表达显著增高,ID1表达显著降低;BMP4+PTE组BMP4、ID1、RARα表达与BMP4组相比均显著降低。结论:龟甲提取物可以促进MSCs增殖,其又可通过调节BMP4的表达防止MSCs的过度增殖。