哈蟆油快速鉴定的开发与应用

摘要

目的:构建哈蟆油药材真伪可视化鉴定的方法,尝试解决哈蟆油药材的鉴别难题。方法:根据改良SDS法,提取哈蟆油DNA。根据GenBank下载中国林蛙基因序列,设计并筛选出特异性最佳的引物;构建蛙类通用引物与特异性引物的PCR双重体系;利用荧光素及生物素标记特异性引物,评价试纸条可视化检测核酸产物的可行性。结果:成功设计并筛选出哈蟆油特异性引物,构建了双重PCR体系。利用标记成功的特异性引物成功构建了核酸产物可视化试纸条,在10 min左右可观察检测结果。通过大量实验样本验证了该种方法的特异性及稳定性。结论:该研究利用核酸产物试纸条进行哈蟆油药材的真伪鉴定,为哈蟆油的快速鉴定提供新的思路和新的方法,同时也具有较高的推广和应用价值。