中药材青葙子PCR鉴别方法研究

摘要

目的:建立一种能特异性检测青葙子及其混伪品的分子鉴定方法。方法:针对青葙子SRAP标记筛选并设计特异性引物,各地采集青葙子、鸡冠花子、苋菜子、刺苋子和反枝苋子样品,提取DNA作为模板,建立并优化PCR反应条件,利用特异性引物对不同产地的青葙子及其混伪品进行扩增和电泳检测,根据特异性条带的大小及有无进行真伪及掺伪鉴别,并对其检出限、耐受性和适用性进行考察与验证。结果:退火温度为60℃、循环次数为30次时,青葙子、鸡冠花子分别在206和581 bp处出现单一明亮条带,其他混伪品及空白对照均无此条带;该方法对青葙子药材DNA的最低检测限为1 ng;对于青葙子中掺杂鸡冠花子的检出限是2%。结论:建立的特异性PCR方法可准确鉴定青葙子及其混伪品。