氧化苦参碱通过提高miRNA-122改善乳腺癌细胞代谢重编程的作用机制研究

摘要

目的:研究氧化苦参碱通过提高乳腺癌细胞中miRNA-122的表达改善其代谢的作用机制。方法:人乳腺癌MCF-7细胞分为空白对照组和氧化苦参碱组,氧化苦参碱组以5、10、20μmol/L氧化苦参碱处理细胞。以流式细胞术检测细胞周期的改变,CCK-8法检测细胞增殖能力,克隆形成实验检测肿瘤细胞克隆形成能力,Transwell小室试验检测肿瘤细胞侵袭能力,同时检测细胞的葡萄糖消耗量和乳酸产生水平,Western blot检测糖代谢关键酶PKM、CS、HK蛋白表达。RT-QPCR检测miRNA-122的表达。miRNA-122的反义寡核苷酸抑制其表达,在此基础上用氧化苦参碱干预。检测乳腺癌的活力和代谢酶的变化。结果:氧化苦参碱处理后,细胞中miRNA-122的表达显著升高,G_(0)/G_(1)期比例显著升高,同时细胞活力显著降低,侵袭能力和克隆形成能力也受到显著抑制,细胞中PKM、CS、HK蛋白表达显著降低。葡萄糖的消耗及乳酸产生水平降低显著(P<0.05)。而反义寡核苷酸抑制miRNA-22的表达后,氧化苦参碱对乳腺癌细胞的上述影响显著减弱(P<0.05)。结论:氧化苦参碱可通过提高miRNA-122的表达,下调代谢酶,改善乳腺癌细胞糖代谢的水平,从而发挥抗肿瘤作用。