水稻硝态氮响应的酵母双杂交文库的构建与分析

摘要

酵母双杂交是在真核生物酵母细胞体内研究蛋白质之间相互作用的一种高效分子生物学技术.为了研究水稻氮吸收与利用的分子调控机理,以硝态氮(5 mmol/L KNO3)诱导处理的水稻9311幼苗为材料,构建水稻在高氮响应条件下的酵母双杂交cDNA文库.实验结果表明,构建的氮响应文库滴度为1.7×108 cfu/mL,文库的重组率为95％,插入片段大小在500～1500 bp之间.从文库中随机挑选10个单克隆,测序后通过NCBI比对分析结果显示9个克隆可以从水稻基因库中找到对应序列.文库的构建将为水稻氮素吸收与利用的分子调控机理研究提供帮助.