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Zif268基因突变体的克隆与真核表达载体的构建

         

摘要

以小鼠转录因子Zif268的三锌指DNA结合区为模板,利用重叠(Overlap)PCR技术,获得Zif268关键氨基酸位点同时突变的三锌指突变体ZF123、2ZF123.以ZF123、2ZF123为模板,PCR扩增获得TAT-ZF123,TAT-2ZF123序列.构建表达质粒pET-28-a+-TAT-ZF123,pET-28-a+-TAT-2ZF123.为利用HIVTAT蛋白的跨膜功能,实现ZF123、2ZF123在哺乳动物细胞中的表达打下基础.

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