棉花高质量DNA的提取及SRAP反应体系的优化

摘要

建立一种简便、快速、经济、有效的gDNA提取方法,并以得到高质量的gDNA为模板摸索棉花SRAP反应体系的最优条件.在提取棉花DNA之前对样品进行预除酚处理,采用CTAB法并加以改进,摸索了一种简便、快速、经济、有效的gDNA提取方法.结果表明预处理除酚法提取天然彩色棉的gDNA为白色,OD260nm/OD280nm平均值达到1.900,OD260nm/OD230nm平均值1.659,琼脂糖电泳检测表明所提取的DNA较完整,RNA含量少;通过对重要参数进行摸索和优化试验,建立一套稳定可靠、扩增效果好、可重复性强的适用于棉花的SRAP反应体系:25μL的反应体系中,模板DNA量30ng、2.5mmolm/LMg2+浓度、0.80μmol/L的上下游引物、200μmol/L的dNTPs以及Taq酶1U.